dsDNA

Na Metabion, consideramos a produção de duplex DNA um “complemento” no portfólio de serviços com base em nossa capacidade incomparável de produzir oligos de ssDNA de alta qualidade de até 220 nts.

Apenas para evitar qualquer possível equívoco em relação à técnica de produção aplicada, não é possível construir dsDNA adicionando pares de bases complementares passo a passo. O método de escolha consiste em sintetizar dois oligos ssDNA separadamente e alinhá-los para formar um duplex via emparelhamento de base complementar. Isso leva à formação de duplexes / dsDNA mais ou menos estáveis.

O que você precisa saber para projetar seu duplex / dsDNA?

A melhor formação duplex é alcançada se os oligos sense e antisense forem 100% complementares. Permitimos posições de oscilação / alongamentos aleatórios e / ou alongamentos parcialmente não complementares para criar “saliências” em ambas as extremidades. No entanto, esteja ciente de que a estabilidade dos duplexes resultantes e seu Tm serão reduzidos.

A responsabilidade de definir / especificar a sequência de ambas as fitas (sense e antisense) é do cliente. Asseguraremos a entrega do que você pede com qualidade superior, mas sem interferências não solicitadas em seus projetos.

A menos que especificado de outra forma, iremos produzir seu DNA duplex / ds com um grupo hidroxila, tanto na extremidade 5 ‘quanto na extremidade 3’. Se você precisar de um grupo fosfato em qualquer extremidade, pode escolhê-lo como uma modificação 5 ‘ou 3’.

Em resumo, nosso serviço padrão de oligonucleotídeo dsDNA fornece fragmentos de DNA lineares não clonados, de fita dupla e verificados em massa em quantidades que permitem um número razoável a muito alto de aplicações / experimentos downstream, como clonagem, cristalização, etc.

Nosso serviço de DNA duplex inclui

• Síntese, purificação e QC de 2 oligonucleotídeos de DNA complementar até um comprimento de 220 nts.
• Mistura equimolar de oligos de DNA QCed individualmente (HPLC analítico e verificação de massa).
• Emparelhamento dos dois oligos, formação do respectivo DNA duplex e “congelamento” do status ds como entrega seca.
• QC do duplex de DNA por espectrometria de massa ESI-ToF.

Caso precise de incluir modificações na sequência,  entre em contato que lhe informaremos todas as possibilidades e lhe enviaremos um orçamento!