M-Block – Controle Sintético
Os blocos de DNA dupla-fita da Metabion são sequências de oligonucleotídeos não clonados, sintetizados a partir de oligonucleotídeos composto por bases de DNA com extensão de até 2.000 pares de bases purificados por HPLC. São produzidos pela sobreposição de oligonucleotídeos sintéticos por meio de recozimento e alongamento por uma técnica baseada em PCR para gerar fragmentos de fita dupla (dsDNA), com baixas taxas de erro para uma triagem eficiente e correta da sequência completa sintetizada.
Principais características para a síntese do m-block:
- Comprimento da sequência entre 200 a 2.000 pb;
- Somente bases de DNA padrão, não sendo possível adicionar bases degeneradas;
- Conteúdo de GC entre 40 –70%;
- Repetições diretas/indiretas/palindrômicas/formando gancho <25 nucleotídeos;
- Nenhum elemento repetitivo com mais de 20 nucleotídeos nas primeiras e últimas 35 bases da sequência (extremidades 5′ e 3′);
- Trechos homopoliméricos não superiores a 18 nucleotídeos para A/T e 12 nucleotídeos para G/C;
- Adição de marcações 5′ fosforilados (grupo 5′-fosfato) ou biotinilados (grupo 5′-biotina) em ambas as fitas;
- Quantidade padrão entregue: 1.000 ng, liofilizados;
- Rigoroso controle de qualidade por eletroforese em gel e sequenciamento Sanger.
Principais aplicações:
Usados em aplicações como engenharia enzimática, pesquisa de anticorpos e estudos de expressão de proteínas. Expressão de gRNA para edição de genes mediada por CRISPR/Cas9, pesquisa de vacinas e podem servir como unidades fundamentais para a construção de fragmentos maiores de dsDNA, construções genéticas completas e até genomas completos. Por último, os fragmentos servem para aplicações como padrões qPCR, controles positivos ou utilização em ensaios de fusão de alta resolução.
O m-block é uma ferramenta essencial para otimizar experimentos em biologia molecular. Ele facilita a preparação de amostras, aprimora a precisão de reações em cadeia da polimerase (PCR) e melhora a eficiência na clonagem de genes. Ideal para laboratórios que buscam inovação e qualidade!